1. Présentation du produit
Nom du produit : poudre probiotique à saveur orale
Spécifications du produit : 2g*30 pièces/boîte
Indications : La composition de souche fournie par ce produit peut inhiber la croissance des principales bactéries pathogènes responsables de la mauvaise haleine et peut soulager efficacement les symptômes de la mauvaise haleine.
Mode d'emploi : 3 fois par jour, 1 comprimé à chaque fois ; il est recommandé de prendre la poudre sèche par voie orale directement après les repas. Les personnes souffrant de mauvaise haleine chronique doivent le prendre pendant une longue période jusqu'à ce que leur haleine redevienne fraîche.
Mode de conservation : A conserver dans un endroit frais, de préférence au réfrigérateur à 4 degrés.
Nombre viable : Mélange de probiotiques (50 milliards d'UFC/g), Bacillus coagulans PB-BC 02 (20 milliards d'UFC/g) et Lactobacillus salivarius HH-LS 17 (30 milliards d'UFC/g).
Autres ingrédients : 200 mg de sorbitol, 200 mg d'acide citrique, 200 mg de poudre de menthe poivrée, 200 mg de vitamine C, 100 mg de fructo-oligosaccharides, 200 mg de galacto-oligosaccharides, 100 mg de sucralose, 100 mg d'arôme alimentaire.
2. Pathogenèse
La flore buccale est un élément clé de la barrière muqueuse buccale et de la réponse immunitaire, qui peut résister à l’invasion d’agents pathogènes et prévenir et traiter les maladies bucco-dentaires. Un déséquilibre microécologique buccal peut détruire la barrière muqueuse buccale et créer des conditions propices à la colonisation de bactéries productrices d'odeurs, provoquant ainsi des maladies buccales telles que l'halitose. L'halitose orale (IOH) représente 80 à 90 % de l'halitose et est principalement causée par la production de composés soufrés volatils par les micro-organismes buccaux. Fusobacterium nucleatum peut décomposer les substrats contenant du soufre dans la cavité buccale en composés soufrés volatils. Les composés soufrés volatils (CSV) et leurs métabolites peuvent également produire des substances telles que le skatole, la cadavérine, l'indole et la putrescine, qui peuvent provoquer une mauvaise odeur buccale.
À l'heure actuelle, les traitements conventionnels de la mauvaise haleine comprennent principalement l'élimination mécanique (brossage des dents, grattage de la langue, etc.), la thérapie chimique (bain de bouche à la chlorhexidine, chewing-gum, etc.), ainsi que le recours à la médecine traditionnelle chinoise et à des produits naturels (polyphénols du thé). , vitamine C, catéchines, etc.). et l'utilisation de probiotiques, etc. Les méthodes de traitement traditionnelles ont des effets à court terme et leur utilisation à long terme peut provoquer un déséquilibre de la flore buccale. Les probiotiques peuvent réguler la flore buccale dès la racine et inhiber la croissance des bactéries productrices d'odeurs. Par conséquent, l’utilisation de probiotiques pour traiter l’halitose est progressivement devenue un point chaud de la recherche.
3. Mécanisme des probiotiques améliorant la mauvaise haleine
Comme les maladies d’origine microbienne, telles que les caries dentaires et la parodontite, la mauvaise haleine peut être traitée microbiennement en ciblant les bactéries responsables qui y sont associées. Les probiotiques peuvent inhiber la croissance des bactéries pathogènes buccales, réguler la flore buccale et maintenir la santé de la microécologie buccale. Les principaux mécanismes par lesquels les probiotiques agissent comprennent les aspects suivants : (1) Compétition pour les sites de liaison, réduction de la colonisation des bactéries pathogènes et co-agrégation avec les bactéries pathogènes. ; (2) rivaliser pour les nutriments et les facteurs de croissance et produire des substances antibactériennes ; (3) Améliorer la réponse immunitaire de l'hôte et inhiber la production de cytokines pro-inflammatoires induites par les agents pathogènes.
4. Les probiotiques de Hehe Biotech pour améliorer la mauvaise haleine
Le numéro de souche de Bacillus coagulans est PB-BC02 et le nom est Bacillus coagulans. Il est déposé au China Type Culture Collection Center de l'Université de Wuhan à Wuhan, en Chine. La date de dépôt est le 12 décembre 2018. Le numéro de dépôt est CCTCC NO : M2018889.
5. Évaluation de l'effet de l'amélioration de la mauvaise haleine
Dans cette étude, 5 souches de probiotiques ont été initialement sélectionnées en évaluant la capacité des probiotiques à inhiber la production de H2S par Fusobacterium nucleatum, puis ont évalué la capacité de 5 souches de probiotiques à inhiber la production de composés sulfurés volatils (CSV) et de biofilm par Fusobacterium. nucléat. Bacillus coagulans PB-BC 02 et Lactobacillus salivarius HH-LS 17 étaient deux souches de probiotiques présentant de bons effets in vitro. Enfin, les taux d'inhibition des probiotiques monosouches et des probiotiques composés sur la croissance de Fusobacterium nucleatum ont été comparés. Les résultats ont montré que le complexe L'effet inhibiteur des probiotiques sur la croissance de Fusobacterium nucleatum est meilleur que celui des bactéries uniques, indiquant que la combinaison de Bacillus coagulans PB-BC 02 et Lactobacillus salivarius HH-LS 17 a pour effet d'améliorer la mauvaise haleine. . Les méthodes de test et les résultats sont les suivants :
5.1 La capacité des probiotiques à inhiber la production de H2S par Fusobacterium nucleatum
Principe du test : La réaction du H2S et du FeSO4 pour produire un précipité de sulfure ferreux noir FeS est utilisée pour évaluer la capacité de différents probiotiques à inhiber la production de H2S par Fusobacterium nucleatum.
Opération spécifique : Préparer une solution de sulfate ferreux et de thiosulfate de sodium, la filtrer sur une membrane filtrante stérile de {{0}},22 μm et l'ajouter au milieu de culture BHI pour obtenir la concentration finale de sulfate ferreux et du thiosulfate de sodium 0,2‰ et du thiosulfate 0,3‰. Ensuite, une suspension bactérienne à 2 % de 109 CFU/mL de Fusobacterium nucleatum a été ajoutée, suivie d'une solution bactérienne probiotique à 5 % et cultivée en anaérobie à 37 degrés pendant 36 h.
Résultats des tests : Écran basé sur la quantité de précipitations produites. "-" signifie aucune précipitation, indiquant que les probiotiques ont une forte capacité d'inhibition contre Fusobacterium nucleatum. "+" a un peu de précipitations, "++" a beaucoup de précipitations et " +++" Il y a beaucoup de sédiments. Les résultats sont présentés dans le tableau 1. Parmi les 31 souches de probiotiques, 11 souches ont eu peu de précipitations, 8 souches ont eu beaucoup de précipitations, 7 souches ont eu une grande quantité de précipitations et 5 souches (Lactobacillus acidophilus HH-LA26, Lactobacillus paracasei HH-LP58, Lactobacillus salivarius HH-LS17, Lactobacillus bifidum HH-BL18 et Bacillus coagulans PB-BC 02) n'ont montré aucune précipitation, ce qui indique leur potentiel à améliorer l'halitose.
Tableau 1 Capacité de 31 souches de probiotiques à inhiber la production de H2S par Fusobacterium nucleatum
|
souche |
numéro de souche |
Montant des précipitations |
souche |
numéro de souche |
Montant des précipitations |
|
Lactobacillus plantaire |
HH-LP56 |
+ |
Pediococcus acidilactici |
HH-PA29 |
++ |
|
Lactobacillus plantaire |
HH-LP78 |
+ |
Pediococcus pentosaceus |
HH-PP57 |
+++ |
|
Lactobacillus reuteri |
PB-LR09 |
+ |
Lactococcus lactis sous-espèce. lactis |
HH-LLL39 |
+++ |
|
Lactobacillus acidophilus |
HH-LA26 |
- |
Lactococcus lactis sous-espèce. cremoris |
HH-LLC36 |
+++ |
|
Lactobacillus rhamnosus |
PB-LR76 |
+ |
Lactococcus lactis sous-espèce. diacétyle |
HH-LLD37 |
+++ |
|
Lactobacillus casei |
PB-LC39 |
+ |
Bifidobactérie lactis |
HH-BA68 |
++ |
|
Lactobacillus paracasei |
HH-LP58 |
- |
Bifidobactérie courte |
HH-BR26 |
+ |
|
Lactobacillus salivaire |
HH-LS17 |
- |
Bifidobactérie longue |
HH-BL18 |
- |
|
Lactobacillus bulgaricus |
HH-LB57 |
++ |
Bifidobactérie bifidum |
HH-BB27 |
++ |
|
Lactobacillus helveticus |
HH-LPH17 |
+ |
Bifidobactérie infantile |
HH-BI27 |
++ |
|
Lactobacillus johnsonii |
LBJ456 |
+ |
Bifidobactérie adolescentis |
HH-BA07 |
+++ |
|
Lactobacillus gasseri |
HH-LG07 |
+ |
Lactobacillus équitable Kumulus subsp. |
HH-LK08 |
+++ |
|
Lactobacillus fermentum |
HH-LF392 |
+ |
Bacillus coagulans |
PB-BC02 |
- |
|
Lactobacillus crispatus |
HH-LC323 |
++ |
Acétobactérie tropicale |
HH-AT01 |
+++ |
|
Lactobacillus sakéi |
LSS858 |
++ |
Lactobacillus plantaire |
N-1 |
+ |
|
Streptocoque thermophilus |
HH-ST08 |
++ |
5.2 La capacité des probiotiques à inhiber la production de composés soufrés volatils (CSV) par Fusobacterium nucleatum
Méthode de test : Cinq souches de probiotiques ont été initialement sélectionnées en fonction de leur capacité à inhiber la production de H2S par Fusobacterium nucleatum, et les VSC produites par Fusobacterium nucleatum ont ensuite été quantifiées à l'aide d'un instrument Halimeter. Un total de 2 mL de suspension bactérienne de Fusobacterium nucleatum à 107 CFU/mL et d’une solution bactérienne probiotique à 15 % (v/v) ont été ajoutés au tube à essai Hungate. Après 9 heures de co-culture, la capacité des probiotiques à inhiber la production de Fusobacterium nucleatum a été mesurée. capacités des VSC.
Résultats des tests : Les CSV sont les principales responsables de la mauvaise haleine. Ils reflètent non seulement le degré de mauvaise haleine, mais endommagent également le tissu des gencives, ce qui constitue un indicateur très important. En mesurant le taux d'inhibition des cinq souches obtenues lors du criblage préliminaire des VSC produites par Fusobacterium nucleatum, les souches ont été davantage criblées. Les résultats sont présentés dans le tableau 2. Parmi eux, la capacité inhibitrice de 3 souches était supérieure à 80 % et le taux d'inhibition de 2 souches était supérieur à 80 %. En dessous de 70 %. Par conséquent, trois souches probiotiques, dont Lactobacillus salivarius HH-LS17, Lactobacillus bifidus longum HH-BL18 et Bacillus coagulans PB-BC02, ont été sélectionnées pour étudier leurs effets sur la formation de biofilm de Fusobacterium nucleatum.
Tableau 2 Effet des probiotiques sur la production de VSC par Fusobacterium nucleatum
|
souche |
numéro de souche |
Taux d'inhibition |
|
Lactobacillus acidophilus |
HH-LA26 |
66% |
|
Lactobacillus paracasei |
HH-LP58 |
63% |
|
Lactobacillus salivaire |
HH-LS17 |
86% |
|
Lactobacillus bifidum longum |
HH-BL18 |
83% |
|
Bacillus coagulans |
PB-BC02 |
90% |
5.3 La capacité des probiotiques à inhiber la formation de biofilm de Fusobacterium nucleatum
Méthode de test : Ajuster la concentration bactérienne de Fusobacterium nucleatum à 107 CFU/mL et laisser reposer 9 heures. Ajoutez-le ensuite dans une plaque à 96-puits. Ajouter 180 μL de suspension bactérienne d’agrégats de Fusobacterium et 20 μL de solution bactérienne probiotique dans chaque puits. 37 Culture au degré pendant 48 h. Dans le groupe témoin négatif, le même volume de milieu MRS a été ajouté à la place du liquide probiotique, et dans le contrôle à blanc, le même volume de BHI a été ajouté à la place du liquide probiotique. Après incubation, laver deux fois avec du tampon PBS, puis fixer avec du méthanol à 99 % pendant 15 min, jeter le surnageant et sécher à température ambiante. Une fois le séchage terminé, ajoutez 100 μL de solution de cristal violet à 0,1 % dans chaque puits, colorez pendant 5 minutes, lavez deux fois avec de l'eau stérile après la coloration, puis placez à température ambiante jusqu'à séchage complet. Enfin, ajoutez 200 μL de solution d’acide acétique à 33 % pour dissolution. Après avoir mélangé avec une pipette, pipeter 175 μL de chaque puits et l’ajouter à une nouvelle plaque de puits 96-, et lire la valeur d’absorbance à 570 nm avec un lecteur de microplaques. La méthode de calcul de la réduction médiée par le biofilm est le taux d'inhibition (%)=(biofilm de contrôle négatif - quantité de biofilm d'intervention surnageant) / biofilm de contrôle négatif.
Résultats des tests : Les poches parodontales et le revêtement de la langue sont des facteurs de risque de mauvaise haleine car ils offrent un environnement de croissance idéal pour les bactéries qui produisent des VSC et d'autres molécules odorantes. Les micro-organismes existent généralement sous forme de biofilms dans les poches parodontales et dans le revêtement de la langue. Fusobacterium nucleatum sert de pont bactérien intermédiaire dans la formation de la plaque dentaire. La formation de son biofilm est la clé de la mauvaise haleine. Par conséquent, inhiber son biofilm est une étape importante pour soulager la mauvaise haleine. Des possibilités sont offertes. La méthode de coloration au cristal violet a été utilisée pour déterminer la capacité de Lactobacillus à inhiber la formation de biofilm par Fusobacterium nucleatum. Les résultats sont présentés dans le tableau 3. Lorsqu'une solution bactérienne probiotique à 5 % a été ajoutée, Bacillus coagulans PB-BC 02 et Lactobacillus salivarius HH-LS 17 ont le meilleur effet d'inhibition, dépassant 35 %. Sur la base des résultats de l'inhibition de la production de VSC et de biofilms par Fusobacterium nucleatum, Bacillus coagulans PB-BC 02 et Lactobacillus salivarius HH-LS 17 ont de meilleurs effets in vitro. Ensuite, leurs effets sur la croissance de Fusobacterium nucleatum sont évalués.
Tableau 3 Effets inhibiteurs des probiotiques sur le biofilm de Fusobacterium nucleatum
|
souche |
numéro de souche |
Taux d'inhibition |
|
Lactobacillus acidophilus |
HH-LA26 |
27.34% |
|
Lactobacillus paracasei |
HH-LP58 |
25.72% |
|
Lactobacillus salivaire |
HH-LS17 |
39.77% |
|
Lactobacillus bifidum longum |
HH-BL18 |
33.86% |
|
Bacillus coagulans |
PB-BC02 |
38.65% |
5.4 Effet des probiotiques sur la croissance de Fusobacterium nucleatum
Méthode de test : Ajouter 190 μL de suspension bactérienne de Fusobacterium nucleatum à 107 UFC/mL à chaque puits d'une plaque à puits 96-, puis ajouter 10 μL de solution bactérienne probiotique, cultiver en anaérobie à 37 degrés et surveiller à 600 nm tous les 3 heures. Mesurez la valeur d’absorbance et tracez une courbe de croissance.
Résultats des tests : De nombreuses maladies bucco-dentaires sont causées par un déséquilibre de la flore buccale. Une certaine capacité antibactérienne aide les probiotiques à réguler la flore buccale. Les résultats sont présentés dans la figure 1. L'effet inhibiteur des probiotiques sur Fusobacterium nucleatum est dans l'ordre des probiotiques composés > Lactobacillus salivarius HH-LS 17 > Bacillus coagulans PB-BC 02 > groupe témoin moyen MRS, indiquant que les deux souches de probiotiques sont Il peut inhiber la croissance de Fusobacterium nucleatum et la combinaison des deux souches a un meilleur effet inhibiteur sur Fusobacterium nucleatum.

Figure 1 Effet des probiotiques sur la croissance de Fusobacterium nucleatum
En résumé, Bacillus coagulans PB-BC 02 et Lactobacillus salivarius HH-LS 17 peuvent inhiber la production de H2S, de VSC et de biofilm par Fusobacterium nucleatum, et la capacité à inhiber la croissance de Fusobacterium nucleatum après la composition est plus forte que celle des souches uniques, indiquant que la combinaison de Bacillus coagulans PB-BC 02 et de Lactobacillus salivarius HH-LS 17 peut améliorer la mauvaise haleine.
les références:
[1] Karbalaei M, Keikha M, Kobyliak NM, Khatib Zadeh Z, Yousefi B, Eslami M. Atténuation de l'halitose grâce à l'utilisation de probiotiques et de leurs mécanismes de protection dans la cavité buccale. Nouveaux microbes, nouveaux infections. 23 avril 2021;42:100887. est ce que je : 10.1016/j.nmni.2021.100887. PMID : 34123388 ; PMCID : PMC8173312.
[2] Penala S, Kalakonda B, Pathakota KR, Jayakumar A, Koppolu P, Lakshmi BV, Pandey R, Mishra A. Efficacité de l'utilisation locale de probiotiques en complément du détartrage et de la planification radiculaire dans la parodontite chronique et l'halitose : un contrôle randomisé procès. J Res Pharm Pract. Avril-juin 2016 ; 5(2) :86-93. est ce que je : 10.4103/2279-042X.179568. PMID : 27162801 ; PMCID : PMC4843589.
[3] Jiang Zhentao. Dépistage des lactobacilles qui inhibent Fusobacterium nucleatum et évaluation de leur efficacité pour améliorer l'halitose [D]. Université de Jiangnan, 2022. DOI : 10.27169/d.cnki.gwqgu.2022.000533.
[4] Huang Zhiqiang, Cheng Yongbo. Construction et évaluation d'un modèle d'halitose de rat provoquée par un déséquilibre de la flore buccale [J]. Recherche en médecine buccale, 2023, 39(08) : 745-750. DOI : 10.13701/j. cnki.kqyxyj.2023.08.015.
[5] Yang Wenjie, Ye Wei. Étude in vitro sur l'effet antibactérien de deux types de probiotiques sur les bactéries responsables de l'halitose [J]. Médecine buccale, 2015, 35(03):179-182.DOI:10.13591/j.cnki.kqyx .2015.03.005.
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